Catharanthus roseus (Apocynaceae) naturally infected with diverse phytoplasmas in Costa Rica / Catharanthus roseus (Apocynaceae) naturalmente infectada con diversos fitoplasmas en Costa Rica

Abstract Phytoplasmas (class Mollicutes) are causal agents of plant diseases with an economic impact on crops or threatening local biodiversity. A survey was conducted from 2012 to 2016 on infected Catharanthus roseus plants that exhibited symptoms reminiscent of phytoplasma infection throughout Costa Rica. A total of 73 plants were collected exhibiting symptoms such as virescence, phyllody, axillary proliferation, little leaf, leaf malformation, chlorosis, or yellowing. All samples were tested by nested PCR using phytoplasma universal and specific primer pairs. Phytoplasma infection was detected in 52 (71.2 %) of the plants collected. Phytoplasmas of six subgroups belonging to 16Sr groups I, III, IX, XIII and XV were identified based on sequencing and in silico RFLP analyses. 'Candidatus Phytoplasma asteris' (16SrI) was the predominant group among the positive samples (n = 30) showing variety of symptoms and wide distribution from sea level to ca. 1 400 m.a.s.l. in six of the seven Costa Rican provinces. Group 16SrIII was the second most abundant (14 samples); and the remaining three groups were seldom found in C. roseus (8 samples). Moreover, group 16SrXIII phytoplasma was detected for the first time in the country. To the best of our knowledge, this is the first report of natural infection of C. roseus with phytoplasma subgroups 16SrI-B, 16SrI-P, 16SrIII-F, 16SrIX-F, 16SrXIII-A, and 16SrXV-B in Costa Rica and Central America.

Resumen Los fitoplasmas (clase Mollicutes) son agentes causales de enfermedades de plantas que provocan pérdidas económicas o amenazan la biodiversidad local. Una recolecta de plantas de Catharanthus roseus que mostraban síntomas de posible infección con fitoplasmas se realizó en diferentes lugares de Costa Rica desde 2012 a 2016. Un total de 73 plantas fueron recolectadas con síntomas tales como viriscencia, filodia, brotación axilar múltiple, reducción foliar, deformación foliar, clorosis, y amarillamiento. Todas las muestras fueron evaluadas mediante PCR anidado usando los pares de imprimadores universales y específicos para fitoplasmas. Infección por fitoplasmas se detectó en 52 (71.2 %) de las muestras. Fitoplasmas de seis subgrupos dentro de los grupos 16Sr I, III, IX, XIII y XV fueron identificados basados en secuenciación del ADN y análisis de polimorfismos de restricción (RFLP) in silico. El grupo predominante encontrado en las muestras positivas (n = 30) fue el 16SrI ('CandidatusPhytoplasma asteris'), éste mostró variedad de síntomas y amplia distribución desde el nivel del mar hasta casi los 1 400 m.s.n.m. en seis de las siete provincias de Costa Rica. El grupo 16SrIII fue el segundo más abundante (14 muestras); y los restantes tres grupos se encontraron en pocas muestras de C. roseus (8 muestras). Además, fitoplasmas del grupo 16SrXIII se detectaron por primera vez en el país. De acuerdo a nuestro conocimiento, este es el primer informe de infección natural de C. roseus con fitoplasmas de los subgrupos 16SrI-B, 16SrI-P, 16SrIII-F, 16SrIX-F, 16SrXIII-A y 16SrXV-B en Costa Rica y Centroamérica.

Subchronic and acute preclinic toxicity and some pharmacological effects of the water extract from leaves of Petiveria alliacea (Phytolaccaceae)

We tested the effects of the aqueous extract of Petiveria alliacea leaves on acute and sub-chronic toxicity, hematocrit and blood glucose level and intestinal motility of male albino NGP mice of 20 to 25 g mean weight. Treatments were in all cases doses of 1,000 and 2,000 mg/kg animal weight and a control treatment with 0.5 ml distilled water, using 10 animals per treatment and administered orally every day (5 days per week). Experimental periods were 18 and 70 days for acute and sub chronic toxicity, respectively. No mortality nor any toxicity signs could be observed. A slight but significant increase in the glucose levels during the first three weeks was observed with the 1,000 mg/kg dose but not for the higher 2,000 mg/kg dose. After administering the doses once after a starving period of six hours, no significant differences in intestinal motility could be found.

Se evaluaron los efectos del estracto acuoso de las hojas de Petiveria alliacea, en la toxicidad aguda y toxicidad subcrónica, hematocritos, niveles de glucosa en la sangre y motilidad intestinal del ratón macho albino NGP, con un peso promedio de 20 a 25g. En todos los casos los tratamientos fueron dosis de 1 000 y 2 000 mg/kg de peso del animal y un tratamiento control con 0.5 ml de agua destilada, usando 10 animales por tratamiento y administrado oralmente cinco días por semana. Los períodos experimentales fueron de 18 y 70 días para toxicidad aguda y toxicidad subcrónica, respectivamente. No se observaron signos de mortalidad ni de toxidad en ambas pruebas. Con la dosis de 1 000 mg/kg hubo un leve pero significativo incremento en los niveles de glucosa durante las primeras tres semanas, pero no con la dosis más alta de 2 000 mg/ kg. Después de administrar las dosis luego de un período de hambre de seis horas, no se encontraron diferencias significativas en la motilidad intestinal.

Toxicidad sub-crónica y prueba de irritabilidad ocular del extracto acuoso de las hojas de Plantago major (Plantaginaceae) / Sub-chronic toxicity and test of eye irritability of leaf aqueous extract from Plantago major (plantaginaceae)

For the sub-chronic toxicity an aqueous preparation of Plantago major leaves was tested in 20 male NGP mice, with an average weight of 20.15 g and separated in two groups of ten individuals each. The dose used was 2000 mg/kg and the control group received 0.5 ml of distilled water. The extract administration was done daily during five days at week for a total period of 40 days. Signs of sub-chronic toxicity were observed in the days two and 12 of treatment. No significant change in corporal weight was observed. The ocular irritation was tested in five New Zeland male rabbits, with an average weight of 3.640 kg. The dose used was a 200 microliters the preparation (100 mg/ml) of Plantago major leaves, instill into the right eye and the control was used the left eye instill 200 microliters of distilled water. The administration was done daily during five days. The extract shows no significant irritation during the observation period.

Toxicidad subcrónica del extracto acuoso de las hojas y los brotes florales de Stachytarpheta jamaicensis (L.) Vahl. (Verbenaceae) / Subchronic toxicity of the aqueous extract from the leaves and floral buds of Stachytarpheta jamaicensis (L.) Vahl. (Verbenaceae)

Se determinó la toxicidad de las hojas y los brotes florales de la especie botánica medicinal Stachytarpheta jamaicensis (L.) Vahl. El material botánico (hojas y brotes florales) fue recolectado en febrero de 1996 por el señor Víctor Rojas del Instituto Nacional de Biodiversidad (número de testigo 400 VR) en Santa Rosa, Guanacaste en las siguientes coordenadas: 10°50´20´´N-85°37´30´´W y una altitud de 290 msnm. Los extractos acuosos, preparados por decocción, de las hojas y los brotes florales de Stachytarpheta jamaicensis, se administraron por vía oral a ratones NGP machos y hembras. El extracto de las hojas se administró durante 90 d y el de los brotes florales durante 60 d. Ambos extractos fueron administrados durante 5 d consecutivos por semana. Los grupos control recibieron 0,5 mL de agua destilada por animal. El extracto acuoso de las hojas causó 40 (por ciento) de mortalidad tanto en machos como en hembras. Se evidenciaron signos de toxicidad con la administración del extracto de los brotes florales sin producir mortalidad. Todos los signos registrados sugieren un efecto general depresor sobre el sistema nervioso central, por lo que se plantea la necesidad de realizar pruebas biológicas dirigidas a la validación de un posible efecto sedante-tranquilizante de esta planta y la realización de curvas dosis-efecto de la toxicidad de esta especie